His-Tag蛋白純化磁珠是一種用于快速、高效純化His標簽融合蛋白的功能化材料。專為高效、快速純化組氨酸標簽蛋白而設計的一種新型功能化材料,可通過磁性分離方式直接從生物樣品中一步純化出高純度的目標蛋白,顯著地簡化了純化工藝,降低了設備需求,適合科研和工業領域便捷快速地進行組氨酸標簽蛋白的純化工作。 His-Tag蛋白純化磁珠與傳統過柱層析純化方式的對比:
1、純化原理
- His-Tag蛋白純化磁珠:基于磁性分離原理,磁珠表面螯合金屬離子(如鎳離子Ni²?或鈷離子Co²?),通過與His標簽蛋白中的組氨酸殘基特異性結合,在磁場作用下實現目標蛋白的分離純化。
- 傳統過柱層析純化方式:利用層析柱中固定相與流動相之間的物理化學作用差異,通過控制流速、緩沖液等條件,使不同蛋白質在柱中停留時間不同,從而實現分離純化。
2、操作流程
- His-Tag蛋白純化磁珠:無需裝柱和過柱層析,無需多次離心、過濾,無需控制上樣流速,操作簡單快捷,熟練操作者1小時內可完成純化。
- 傳統過柱層析純化方式:需要進行裝柱、平衡柱、上樣、洗脫等多個步驟,操作復雜,耗時較長,且對操作技術要求較高。
3、設備需求
- His-Tag蛋白純化磁珠:無需昂貴的柱層析設備,只需簡單的磁性分離裝置。
- 傳統過柱層析純化方式:需要專業的層析設備,如層析柱、泵、檢測器等。
4、純化效率
- His-Tag蛋白純化磁珠:一步純化即可獲得高達95%以上純度的目標蛋白,產率一般為70%~80%,可輕松實現多樣品平行處理。
- 傳統過柱層析純化方式:純化效率受多種因素影響,純度和產率可能因操作條件不同而有所差異,且難以實現高通量處理。
5、成本
- His-Tag蛋白純化磁珠:雖然磁珠本身有一定成本,但無需額外的層析設備,且可重復使用,總體成本較低。
- 傳統過柱層析純化方式:需要購買昂貴的層析設備,且設備維護和耗材成本較高。
6、適用范圍
- His-Tag蛋白純化磁珠:廣泛適用于細菌、酵母、昆蟲和哺乳動物細胞等分泌或胞內表達的可溶性組氨酸標簽蛋白以及變性蛋白的純化。
- 傳統過柱層析純化方式:適用于多種類型的蛋白質純化,但對His-Tag蛋白純化而言,磁珠法更具優勢。
His-Tag蛋白純化磁珠在操作簡便性、純化效率、設備需求和成本等方面具有明顯優勢,特別適合His-Tag蛋白的快速純化和高通量處理。傳統過柱層析純化方式雖然適用范圍更廣,但在His-Tag蛋白純化中操作復雜、耗時長、成本高。