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2× KOD PCR Master Mix(含染料)
簡要描述:

本產品含紅色示蹤染料,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進行電泳;也可經過純化處理,以用于酶切、連接、測序等后續操作。
2× KOD PCR Master Mix(含染料)

  • 產品型號:71517
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2025-07-17
  • 訪  問  量:260
詳情介紹

2× KOD PCR Master Mix (含染料)

 

2× KOD PCR Master Mix(含染料)


目錄號:71517

產品內容

產品成份

71517-05

71517-0100

2× KOD PCR Master Mix

5× 1 ml

100× 1 ml

保存條件

-20℃保存,有效期 2 年。經常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 個月。


具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準


產品簡介

本產品包含KOD DNA Polymerase、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液,濃度為2×。該酶所具有的chao強3’→ 5’外切酶活性使得其保真性比Pfu DNA Polymerase 更高,保真性是Taq DNA Polymerase的80倍,同時具有合成速度快的特點,聚合速度約為普通Pfu DNA Polymerase的5倍,Taq DNAPolymerase的2倍,達到100-138bp/秒,可以在短時間內獲得高產量的擴增產物,特別適合于高保真地擴增6kb以內的PCR 產物,擴增所得的DNA為平末端,可用于基因克隆、表達及突變分析等分子生物學實驗。

KOD擴增的PCR產物為平末端(Blunt),可直接用于Blunt載體克隆(Cat#V116、V117)

本產品含紅色示蹤染料,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進行電泳;也可經過純化處理,以用于酶切、連接、測序等后續操作。

產品特點

1. 高產:產量是普通 Taq 酶的 2 倍!

2. 高效:延伸速度 100-138bp/sec!

3. 高成功率:對于高 GC 模板和特殊結構的復雜模板有良好效果!

 

2 × KOD PCR Master Mix 使用說明:

一、配制 PCR 反應體系:(于冰上配制)

Component

20 μl Reaction

50 μl Reaction

終濃度

2× KOD PCR Master Mix

10 μl

25 μl

1 ×

Forward Primer(10 μM)

0.4 μl

1 μl

0.2 μM

Reverse Primer(10 μM)

0.4 μl

1 μl

0.2 μM

Template DNA

<0.2 μg

<0.5 μg

as required

ddH2O

up to 20 μl

up to 50 μl


參考模板用量:(以 50 μl 反應體系為例)

質粒:0.1-10 ng;

細菌基因組:10-100 ng;

人類基因組:50-150 ng;

cDNA:1-5 μl from RT。

注意:用 ddH2O 補足反應體系(體積)至 50 μl。實際操作中,首先要計算好需要補加 ddH2O 的量以后,建議先加水,然后按上述順序添加其它成分,最后添加 KOD DNA Polymerase。充分混勻后,離心數秒使反應混合物沉到管底,然后將反應管置于 PCR 儀中進行擴增。

二、設置 PCR 循環條件:(請根據實際情況適當調整)

Step

Temperature

Time

Cycle Number

Initialdenaturation

94℃

3 minutes


Denaturation

94℃

20-30 seconds

30-35 cycles

Annealing

50-60℃

20-30 seconds

Extension

72℃

1-4kb / minute

Final Extension

72℃

5 minutes



4-8℃

Hold


注意:一般情況下,Annealing Temperature = Tm - 5°C

如果擴增片段小于 4 kb,建議 KOD 酶的延伸速度為 1kb / 15 sec;

如果擴增片段大于 4 kb,建議延伸速度為 1kb / 20-30 sec。

三、結果檢測:反應結束后取 5 µl 反應產物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。


2× KOD PCR Master Mix(含染料)


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