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2x SYBR qPCR Mix(Without ROX)熒光定量
簡要描述:

2x SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑,為2x 預混液,包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分,可減少操作步驟,縮短加樣時間,降低污染幾率。
2x SYBR qPCR Mix(Without ROX)熒光定量

  • 產品型號:71321
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2025-07-17
  • 訪  問  量:149
詳情介紹

2x SYBR qPCR Mix(Without ROX)  


2x SYBR qPCR Mix(Without ROX)熒光定量


目錄號:71321

產品內容

Components

71321-500

500 rxns (20   μl/rxn)

71321-2500

2500 rxns (20   μl/rxn)

2x SYBR qPCR Mix

5x 1ml

25x 1ml

保存條件

-20℃保存,有效期 24 個月。使用前,充分融解,輕柔顛倒混勻,短期使用可放在4 ℃,避免反復凍融。


具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準  


產品簡介

2x SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑,為2x 預混液,包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分,可減少操作步驟,縮短加樣時間,降低污染幾率。其核心組分是全新抗體法的Hotmaster Taq DNA聚合酶,配合精心優化的Buffer體系,有效抑制非特異性擴增,可對寬廣濃度范圍的模板進行準確定量,獲得穩定可靠的qPCR結果,具有靈敏度高、特異性強、穩定性好等特點。

本品不含參比染料ROX,適用于不需要ROX校準的儀器,常見的是Bio-rad系列、Roche、國產qPCR儀。Roche、國產qPCR儀。

操作步驟:


1. 將DNA模板、引物、2 x SYBR qPCR Mix、ddH2O溶解并置于冰上備用。

2. 冰上配制qPCR反應體系:(以20μl反應體系為例)

Components

Volume (20μl)

Final Concentration

2x SYBR qPCR Mix

10 μl

DNA Template

Variable

As required

Forward Primer (10μM)

0.4 μl

0.2 μM each

Reverse Primer (10μM)

0.4 μl

0.2 μM each

ddH2O

Up to 20 μl

Not applicable

注意:

1) 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應體系,cDNA原液≤總反應體系的10%,基因組DNA的量為10-100 ng。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數不同,可對模板進行梯度稀釋,以確定最佳的模板使用量。

2) 通常推薦引物濃度為0.2 μM,就可以得到較好的結果,反應效果不佳時可在0.1 - 1.0 μM范圍內進行調整。擴增效率不高的情況下,可提高引物濃度;發生非特異性反應時,可降低引物濃度,由此優化反應體系。





3. qPCR反應程

注意:

1) 本產品兼容性強,絕大多數情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果。一般來說,二步法擴增特異性高,三步法擴增效率高。如果融鏈曲線較差,可以嘗試兩步法擴增或提高退火溫度;如果因使用Tm值較低的引物等原因,得不到良好的實驗結果時,可嘗試加長延伸時間或者進行三步法PCR擴增。

2) 根據引物的Tm值進行退火&延伸(退火)溫度的設定;

3) 延伸(退火&延伸)時間的設置還需要根據您所使用的qPCR儀所需要的最短數據采集時間自行調整。

4) 融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進行設定。


2x SYBR qPCR Mix(Without ROX)熒光定量


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