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2xUniversalSYBRGreenqPCRMix熒光定量
簡(jiǎn)要描述:

預(yù)混液中含有通用型ROX,適用于所有qPCR儀,使用qPCR Mix時(shí)不需要額外添加ROX來(lái)校正儀器。
2xUniversalSYBRGreenqPCRMix熒光定量

  • 產(chǎn)品型號(hào):71600
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2025-07-17
  • 訪  問(wèn)  量:236
詳情介紹

2 x Universal SYBR Green qPCR Mix

 

 

2xUniversalSYBRGreenqPCRMix熒光定量


目錄號(hào):71600

產(chǎn)品內(nèi)容

Components

71600-500

500 rxns (20 μl/rxn)

71600-2500

2500 rxns(20μl/rxn)

2x Universal SYBR GreenqPCRMix

1 ml x5

1 ml x25

保存條件

-20℃保存,有效期 24 個(gè)月。使用前,充分融解,輕輕顛倒混勻,短期使用可放在 4 ℃,避免反復(fù)凍融。


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)


產(chǎn)品簡(jiǎn)介

2× Universal SYBR Green qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑,為2x 預(yù)混液,包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分,可減少操作步驟,縮短加樣時(shí)間,降低污染幾率。其核心組分是全新的Hotmaster Taq DNA聚合酶,配合精心優(yōu)化的Buffer體系,有效抑制非特異性擴(kuò)增,可對(duì)寬廣濃度范圍的模板進(jìn)行準(zhǔn)確定量,獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結(jié)果,具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。

預(yù)混液中含有通用型ROX,適用于所有qPCR儀,使用qPCR Mix時(shí)不需要額外添加ROX來(lái)校正儀器。

操作步驟:

1. 將DNA模板、引物、2 x Universal SYBR Green qPCR Mix、RNase-Free H2O溶解并置于冰上備用。

2. 冰上配制qPCR反應(yīng)體系:(以20μl反應(yīng)體系為例)

Components

Volume (20μl)

Final Concentration

2 x Universal SYBR Green qPCR Mix

10 μl

DNA Template

Variable

As required

Forward Primer (10μM)

0.4 μl

0.2 μM each

Reverse Primer (10μM)

0.4 μl

0.2 μM each

RNase free H2O

Up to 20 μl

Not applicable

注意:

1) 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應(yīng)體系,cDNA原液≤總反應(yīng)體系的10%,基因組DNA的量為10-100 ng。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數(shù)不同,可對(duì)模板進(jìn)行梯度稀釋,以確定最佳的模板使用量。

2) 通常推薦引物濃度為0.2 μM,就可以得到較好的結(jié)果,反應(yīng)效果不佳時(shí)可在0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。擴(kuò)增效率不高的情況下,可提高引物濃度;發(fā)生非特異性反應(yīng)時(shí),可降低引物濃度,由此優(yōu)化反應(yīng)體系。

3. qPCR反應(yīng)程序

注意:

1) 本產(chǎn)品兼容性強(qiáng),絕大多數(shù)情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果。一般來(lái)說(shuō),二步法擴(kuò)增特異性高,三步法擴(kuò)增效率高。如果融鏈曲線較差,可以嘗試兩步法擴(kuò)增或提高退火溫度;如果因使用Tm值較低的引物等原因,得不到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí),可嘗試加長(zhǎng)延伸時(shí)間或者進(jìn)行三步法PCR擴(kuò)增。

2) 根據(jù)引物的Tm值進(jìn)行退火&延伸(退火)溫度的設(shè)定;

3) 延伸(退火&延伸)時(shí)間的設(shè)置還需要根據(jù)您所使用的qPCR儀所需要的最短數(shù)據(jù)采集時(shí)間自行調(diào)整。

4) 融解曲線分析請(qǐng)以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進(jìn)行設(shè)定。

相關(guān)產(chǎn)品:

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71519-500 2x SYBR Green qPCR Mix (With 100x ROX) 同TB Green Premix Ex Taq

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀) 同V公司的Q711


2xUniversalSYBRGreenqPCRMix熒光定量


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