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DNA Quick Ligation Kit T4原理載體及其他
簡要描述:

本試劑盒可在室溫(22°C) 10分鐘條件下,迅速完成DNA 片段粘端或平端連接反應。連接產(chǎn)物可直接轉(zhuǎn)化。可用于DNA 片段克隆,文庫構建,TA克隆,Linker連接等。
DNA Quick Ligation Kit T4原理載體及其他

  • 產(chǎn)品型號:42110
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2025-07-17
  • 訪  問  量:180
詳情介紹

DNA Quick Ligation Kit

 

 

DNA Quick Ligation Kit T4原理載體及其他


目錄號:42110

目錄編號

包裝單位

42110-20

20次

42110-60

60次


Components

42110-20

42110-60

2 xQuick Ligation Buffer

100 ml

300 ml

T4 DNA ligase, 5 U/ml

100 U

300 U

產(chǎn)品儲存:-20°C 保存,避免反復凍融次數(shù)過多。


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準


制品說明:本試劑盒可在室溫(22°C) 10分鐘條件下,迅速完成DNA 片段粘端或平端連接反應。連接產(chǎn)物可直接轉(zhuǎn)化。可用于DNA 片段克隆,文庫構建,TA克隆,Linker連接等。

特點快速、簡單、粘端平端均可以在10分鐘內(nèi)完成連接反應。

操作步驟:

1.   反應按以下體系進行:

ml

2 xQuick Ligation Buffer

ml

Vector DNA(30-60ng)

ml

Insert DNA(載體摩爾數(shù)量的3倍量,插入和載體摩爾比為3:1)

ml

無菌水

ml(5 Weiss Units/ml)

T4 DNA Ligase

Final Volume

10ml

一般最后加入T4 DNA Ligase, 充分混勻,可瞬間離心收集液體至管底。

2.   22°C連接10分鐘(一般可在PCR儀器完成)。

通常推薦22°C連接5-10分鐘 ,>3kb長片段連接可以延長至30分鐘。不推薦超過30分鐘,超過可能降低轉(zhuǎn)化子數(shù)量。

3.   冰上冷卻,然后直接轉(zhuǎn)化或貯存于-20°C

     如儲存于-20°C,轉(zhuǎn)化前應該置冰上重新溶解,充分混勻后進行轉(zhuǎn)化。

說明:

1.   轉(zhuǎn)化前不要熱滅活T4 DNA ligase,否則將降低轉(zhuǎn)化效率。

2.   DNA片段體積大于4 ml的,可增加2 xQuick Ligation Buffer,總反應體積相應可以增至20 ml,這樣在連接體系中可加入更大體積的DNA片段。


DNA Quick Ligation Kit T4原理載體及其他


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