由Pfu、HiFi、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNA片段，如該平末端DNA片段需要和T載體相連接，需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補(bǔ)連接。
平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他

產(chǎn)品型號(hào)：42016
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
更新時(shí)間：2025-07-17
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平末端DNA加A試劑盒

平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他

目錄號(hào)：42016

試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性：

組成	25次(42016-25)	50次（42016-50）
Taq DNA polymerase	25ml	50ml
10 x A-tailing buffer	25ml	50ml
dATP Mix	25ml	50ml

儲(chǔ)存：-20 ℃ 保存。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品介紹：

由Pfu、HiFi、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNA片段，如該平末端DNA片段需要和T載體相連接，需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補(bǔ)連接。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分，可以在20分鐘左右完成整個(gè)過程。

操作步驟：

1. 平末端PCR產(chǎn)物用PCR清潔（無非特異擴(kuò)增）或者膠回收純化（有非特異擴(kuò)增）。

2. 純化好的平末端DNA片段按以下反應(yīng)體系加A尾:

平末端DNA片段	1-7ml（不超過1mg）
dATP Mix	1ml
10 x A-tailing buffer	1ml
Taq DNA polymerase	1ml

3. 輕輕混勻后72℃保溫20-30 分鐘。

4. 加A尾的產(chǎn)物可以不需要再次清潔或者膠回收純化，取1-2ml直接用于連接反應(yīng)。

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