H2S 含量測定試劑盒說明書

微量法 100T/96S

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：

H2S 是一種新型氣態(tài)信號分子，存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì)，生理濃度的H2S 對神經(jīng)系統(tǒng)海馬的長時程增強(qiáng)功能具有重要的調(diào)節(jié)作用，并對自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。

測定原理：

H2S 與醋酸鋅、N, N-二甲基對苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍(lán)，亞甲基藍(lán)在 665nm 處有最大吸收峰，通過測定其吸光值可計算H2S 含量。

H2S 含量測定試劑盒   信號系列-常備現(xiàn)貨

組成：

自備儀器和用品：

天平、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96 孔板、蒸餾水。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

樣品處理：

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴ 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加入 1ml 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 10000g， 4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。

3. 血清（漿）：直接測定。

操作表：

1、酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長至 665nm。

2、操作表

H2S 含量計算公式：

用 96 孔板測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：y = 0.0022x，R2 = 0.9988

（1） 組織樣品

a.按照蛋白濃度計算

H2S（nmol/mg prot）= b.按照樣本重量計算 H2S（nmol/g 鮮重）=

(3) 細(xì)胞

H2S（nmol/10⁴ cell）=

ΔA ×V 反總÷(V 樣×Cpr)=681.8×ΔA÷Cpr

0.0022

ΔA ×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)= 681.8×ΔA÷W

0.0022

ΔA ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量(萬個)）=681.8×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量（萬個）

0.0022

（2） 液體樣品H2S（nmol/ml）=

ΔA ×V 反總÷V 樣= 681.8×ΔA

0.0022

V 反總：反應(yīng)總體積，0.225ml；V 樣：反應(yīng)中樣品體積，0.15ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：蛋白濃度，mg/ml

注意事項(xiàng):zui低檢出限為 1nmol/ml。

H2S 含量測定試劑盒   信號系列-常備現(xiàn)貨